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          基礎(chǔ)信息Product information
          產(chǎn)品名稱:

          大鼠心肌成纖維細(xì)胞

          產(chǎn)品簡介:

          大鼠心肌成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:HRAS樣抑制因子2抗體 GLP1類似蛋白Exendin4抗體 PSD95相關(guān)緊密連接蛋白PATJ抗體 大鼠胸腺淋巴細(xì)胞 小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 MKN1人胃癌細(xì)胞 NRK (大鼠腎細(xì)胞)

          產(chǎn)品型號:

          廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

          訪問量:662

          更新時(shí)間:2025-04-09

          產(chǎn)品特性Product characteristics

          大鼠心肌成纖維細(xì)胞

          大鼠心肌成纖維細(xì)胞

          商品屬性:

          組織來源

          產(chǎn)品規(guī)格

          細(xì)胞形態(tài)

          貨號

          心臟組織

          5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          成纖維細(xì)胞樣

          YS-01X7271

          細(xì)胞簡介:

          大鼠心肌成纖維分離自心臟組織;心臟由心肌細(xì)胞和非心肌細(xì)胞組成,非心肌細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的70%,其中90%以上的非心肌細(xì)胞由心肌成纖維細(xì)胞組成。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的心肌成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。近年來,人們逐漸了解到非心肌細(xì)胞不僅對心肌細(xì)胞具有結(jié)構(gòu)上的支持、保護(hù)作用,而且還具有自分泌和旁分泌功能,影響心肌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和生理功能;心肌成纖維細(xì)胞主要功能為對心肌細(xì)胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負(fù)責(zé)細(xì)胞基質(zhì)外的合成,當(dāng)心肌損傷時(shí)能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細(xì)胞是心臟結(jié)締組織中常見的細(xì)胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機(jī)基質(zhì),并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細(xì)胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細(xì)胞,其功能活動也得以恢復(fù),參與組織損傷后的修復(fù)。因此,對心肌成纖維細(xì)胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個重點(diǎn)。

          方法簡介:

          公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          質(zhì)量檢測:

          公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          培養(yǎng)信息:

          培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

          換液頻率 每2-3天換液一次

          生長特性 貼壁

          細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

          傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

          消化液 0.25%

          培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO25%

          大鼠心肌成纖維細(xì)胞

          細(xì)胞傳代及凍存:

          細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
          如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

            ① 組織塊培養(yǎng)法

            組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

            ② 消化培養(yǎng)法

            ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

            對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

            ④器官培養(yǎng)

            器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

          大鼠心肌成纖維細(xì)胞


          公司正在出售的產(chǎn)品:

          兔血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體1   英文名稱:   Rabbit Lctin like oxLDL Receptor 1   規(guī)格:      英文縮寫:   LOX-1

          兔脂氧合酶同工酶   英文名稱:   Rabbit Lipoxygenase Isozymes   規(guī)格:      英文縮寫:   LOXI

          兔基質(zhì)金屬蛋白酶 1   英文名稱:   Rabbit Maix Metalloproteinase 1   規(guī)格:      英文縮寫:   MMP-1

          兔基質(zhì)金屬蛋白酶 2   英文名稱:   Rabbit Maix Metalloproteinase 2   規(guī)格:      英文縮寫:   MMP-2

          小鼠αN已酰基葡糖苷酶(αNAG)ELISA 試劑盒 96T/48T

          Rat aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒

          Humanplacealactogen,HPLELISAKit 人胎盤催乳素(HPL)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          HumanChromogranin,CgA試劑盒人嗜鉻蛋白A(CgA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          總脂肪酶(lipase)定量試劑盒50

          Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          肝腸鈣粘連蛋白重組兔單克隆抗體

          生物鐘KAT13D蛋白抗體

          CD63重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

          CT (Calcitonin 0.5mgCT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原)

          FCER2重組人 CD23 / FCER2 蛋白 Protein

          H1F0 Protein Human 重組人 H1F0 / Histone H1 蛋白

          PCSK9 Protein Mouse 重組小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白

          CT (Calcitonin 0.5mgCT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原)

          H1F0 Protein Human 重組人 H1F0 / Histone H1 蛋白

          CD63重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

          PCSK9 Protein Mouse 重組小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白

          FCER2重組人 CD23 / FCER2 蛋白 Protein

          大鼠心肌成纖維細(xì)胞大鼠組蛋白H2A(H2A)試劑盒 ,英文名: H2A ELISA Kit

          Mouse ai thyroglobulin aibody (ATGA/TGAB) ELISA Kit 小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)試劑盒

          MouseIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

          CLIAKitforHumanlymphocytefunctionassociatedaigen2,LFA-2ELISAKit人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2

          土壤元素?zé)晒舛吭噭┖?span>20

          ELISAKitdsDNA大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

            一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

            1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

            2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

            3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

            4、 胎牛血清濃度為10%-80%

            5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;

            7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

            8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

            二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

            1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

            2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

            3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

            4、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

            5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

            6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。


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