人關節韌帶成纖維細胞

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更新時間：2025-04-09

人關節韌帶成纖維細胞

商品屬性：

細胞簡介：

人關節韌帶成纖維分離自關節韌帶組織；韌帶是纖維結締組織，將各個骨頭在關節處連接起來，并在關節活動時加固關節穩定關節。其中顳下頜關節、踝關 節、膝關節韌帶組織研究較多，顳下頜關節兩側各有三條，即顳下頜韌帶、莖突下頜韌帶和蝶下頜韌帶。踝關節周圍韌帶根據其解剖位置可以分成3組，外側韌帶 ，內側三角韌帶，脛腓聯合韌帶。膝關節的韌帶有囊外韌帶和囊內韌帶,其共同作用為加強關節的穩定性。囊外韌帶主要有:髕韌帶位于髕骨的下部，關節囊的前 方,是股四頭肌肌腱的延續,向下附著于脛骨粗隆，兩側有側副韌帶加強；囊內韌帶:主要為交叉韌帶:前交叉韌帶附著于脛骨髁間隆起前份和股骨外側髁的內側面 ，防止脛骨過度前移;后交叉韌帶附著于脛骨髁間隆起后份與股骨內側髁的外側面，防止脛骨過度后移。另外，在膝關節內尚有膝橫韌帶。任何關節韌帶均可由于 外傷而發生損傷，但影響較大又較常見的是膝關節韌帶損傷和踝關節韌帶損傷。膝關節韌帶損傷，常見者為膝關節側副韌帶損傷。多因膝關節微屈時，突然受到 內翻或外翻的沖擊力所致。踝關節韌帶損傷。多因行走或跑跳時誤入不平之處所致。以外側損傷多見。韌帶是致密纖維結締組織，主要特點是細胞、基質成分少 ，纖維非常多、纖維粗大排列緊密，且排列方向與承受張力的方向一致，有很強的保護和支持作用。韌帶主要包含韌帶成纖維細胞。人關節韌帶成纖維對研究關節韌帶損傷有重要意義。

方法簡介：

實驗室分離的人關節韌帶成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

實驗室分離的人關節韌帶成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基：基礎培養基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

人關節韌帶成纖維體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

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原代細胞的培養條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

　　1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發生脫落，漂浮；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養

　　1、原代培養時要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；

　　4、長期培養時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行